1.痰结核菌检查 为确诊肺结核最特异性方法.厚涂片抗酸染色镜检快速简便,阳性率高,假阳性少,为目前普遍推荐.痰抗酸杆菌阳性提供初步诊断.据估计痰涂阳性其结核菌最低浓度为10个/ml,50%~80%肺结核患者痰涂阳性.结核菌培养可以与其他抗酸杆菌得以鉴别,除非已经化疗者偶可出现涂片检查阳性培养检查阴性,在未治疗的肺结核培养的敏感性和特异性均高于涂片检查.培养菌株进一步作药敏测定,可为治疗特别是复治提供重要参考.涂阳(涂片检查阳性)病例化疗7~10天内对实验室结核菌生长极少影响,而仅有极少量排菌的涂阴(涂片检查阴性)病例化疗迅速影响培养结果,故必须在化疗开始前留取标本.在无痰和不会咳痰的低年儿童清晨抽取胃液检查结核菌,必要时仍是一种值得采用的方法.在成人应用雾化导痰或经气管穿刺吸引采样,亦是可供选择的采样方法.结核菌培养的最大缺点是生长缓慢,需要4~6周才见菌落,若连续作药敏检测则需3~4月之久,而且还存在阳性率尚欠理想和难于标准化等问题.由于结核菌dna合成所需酶的结构异常,长期来关于快速培养的研究均无突破.目前应用bactec460tb系统解决了结核菌快速检测的难题.这采用含放射性14c棕榈酸为底物的7h12分枝杆菌培养基,当检测标本接种于该培养基后,若有分枝杆菌存在,则其代谢产物与底物作用生成14co2后者送入电离室,并自动显示测定结果.加入nap(p-nitro-acetylamino-β-hydroxypropiophenone)药物便可与非典型分枝杆菌相鉴别.此系统亦可进行抗结核药物的敏感性测定.多数应用表明,bactec系统用于分枝杆菌的检测平均9天、结核菌鉴别5天、药敏试验6天即能完成,便检测时间显著缩短,与常规方法符合率极高.其缺点是设备及试剂昂贵,而且可能低估耐药性.老年人结核误诊率高,病变范围较广,易形成空洞,故痰查结核菌阳性率较高,可高达85.9%.2.结素试验 结素是结核菌的代谢产物,主要成分为结核蛋白,从液体培养基生长的人型结核菌滤液制备而成.旧结素(ot)抗原不纯,可引起非特异性反应.纯蛋白衍生物(ppd)优于ot,以硫酸作沉淀制成的ppd-s经who定为哺乳类国际标准结素,而who委托丹麦生产的定名为ppf-rt-32(加tween80稳定剂)的结素为国际上所广泛采用.但是ppd抗原仍然比较复杂.结素试验常用皮内注射法.以0.1ml结素释液于左前臂内侧皮内注射,使局部成皮后,48~72h观察和记录结果.不同结素制剂0.1ml的相应效价和含量见表1.流行病学调查和临床一般均以5tu为标准剂量.结果判断以72h局部肿结直径大小为依据:≤4mm阴性(-),5~9mm弱阳性反应(+),10~19mm中度阳性反应(++),≥20mm或虽然不超过此直径但不水疱,坏死,为强阳性反应(+++).短期重复试验可引起复强效应,故临床应用直接采用标准剂量,不主张从小剂量开始逐渐增加,重复试验.老年人由于免疫功能低下,结核菌素试验阳性率低且≥70岁者更低仅10%左右.
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