(一)微生物检查
1.角膜刮片检查:常规角膜刮片,体积分数100%甲醇固定,吉姆萨或革兰染色,镜检.
2.病原体培养与鉴定
(1)细菌培养:常规采用血平板、麦康凯和巧克力培养基(置于体积分数5%co2培养缸),特殊标本置于心脑浸液或营养肉汤中增菌,35℃培养24~48小时.可疑放线菌感染标本,延长培养时间至72小时;可疑厌氧菌感染标本,接种厌氧血平板,置于厌氧产气袋中培养72小时;可疑非结核分枝杆菌感染标本,接种于改良罗氏培养基,培养15~30天.据细菌菌落的特点及抗酸染色结果,进行初步鉴定;再用鉴定培养基、全自动鉴定及药敏测试仪进一步鉴定菌种.
(2)真菌培养:标本接种在马铃薯葡萄糖培养基上,28℃、40%的湿度孵育8~10天,根据菌落外观、菌丝、孢子及形态进行菌种鉴定.
(3)棘阿米巴培养:采用含大肠杆菌15g/l非营养琼脂培养基,28℃培养15天.角膜刮片或培养检查中,任一项为阳性者,即诊断为阿米巴角膜炎患者.
(二)体外药敏试验
采用k-b纸片扩散法.细菌在培养基上形成菌落后,取菌落并稀释至0.5麦氏单位,均匀涂布在mh平板上,放置药敏纸片,35℃~37℃培养16~18小时,根据所形成抑菌环的直径大小,按照nccls标准,判定敏感、中介或耐药;真菌在马铃薯葡萄糖培养基(斜面固体培养基)上形成菌落后,用拭子取菌丝和孢子在生理盐水中冲洗,达到麦氏比浊度0.5~1,均匀涂布于沙保罗培养基上,放置药纸片,28℃培养1~2天,测量抑菌环的直径.